细节化的解析细胞程序降温仪应用原理
生物样本大都对温度*其敏感,尤其是细胞样本、制品。随着细胞治疗的快速发展,细胞冷冻技术及效果变得更加重要。现在也有一些冷冻降温是通过高溶度的冻存保护剂保障活率,大剂量的冻存保护剂往往对细胞、回输受体有害,如何安全有效的提高细胞及制剂的冷冻效果,是一个重要步骤。
二、生物样本冻存步骤
生物样本冻存步骤:干细胞采集或分离培养→产品收集或分装(冷冻血袋或冻存管等)→预冷(一般4℃)→ 添加冷冻保护剂→ 程序降温→储存槽暂存→转移→长期存储
生物样本冻存步骤
生物样品的成功冻存不仅取决于合适的冷冻保护剂,更取决于冷冻的速率、精度高的温度控制和合理的温度梯度(50℃~80℃)。
在细胞冻存的过程中,样本内水分会从液相转变为固相,水分也随之散失,导致细胞内盐、代谢物浓度改变,进而造成渗透压失衡,直接影响冻存细胞的复苏。同时冷冻的速率太快或者太慢,容易导致细胞内水分丧失或形成大冰晶,都不利于细胞存活。另外,生物样本内水分的相变过程也伴随着潜热释放的现象,在从液相转变为固相时会释放出大量热量,使样本温度瞬速上升,细胞往往会在温度剧烈变化中死亡。通过使用细胞欣谕程序降温仪,选择合适的冻存液,设定合适的升降温速率,可有效地克服上述不利因素。实践证明,(经温度补尝后)每分钟1-3℃的冷冻速率可大大提高冻存细胞的存活率。
从液相转变为固相时释放出大量热量
传统的生物样本降温通常采用-80℃低温冰箱进行分步骤冷冻,该方法的不足为:耗时长,整个降温过程大约需要一天的时间;在降温过程中需要人为多次转移,给样本的降温带来众多不可控因素,从而导致样本的存活率降低;无法有效地消除结晶过程中释放的潜热,增大了样本的死亡率。
当然还有一些特殊生物样品的制备工艺和程序降温需要的温度更低,所以更需要程序降温仪这款设备,目前欣谕品牌程序降温仪可以控制温度40~--180度,温度点控制准确度小于等于0.5度。
生物样品的成功冻存取决于冷冻的速率,精度高的温度控制和合理的温度梯度(+40℃ -180℃)。当温度降至-180℃时,大部分生物样品可转移至液氮中长期保存。